有关细胞离心,我们对遇到的常见问题做一个总结:
1、细胞离心的转速和时间。
2、细胞离心转速太高会不会出现细胞死亡。
3、细胞离心多少g.
4、细胞离心目的和原理。
5、哪些实验需要做细胞离心。
辛辛苦苦培养的细胞,如果因为离心转速太高,出现细胞死亡,这种重新再来的心情小编深有体会,为了更好的做好实验室离心机细胞分离的这一课,我们请来专家进行一一讲解。
细胞离心机
因为转速(RPM)不等同于相对离心力,同样的转速得到的离心效果并不尽相同,根本的解决方法还是使用相同的相对离心力(RCF)。
1.保证细胞转移的*性
低速离心可以防止细胞液积存在管盖和管壁,保证细胞转移的*性。
2.便于控制细胞浓度
对于细胞浓度要求高的实验,比如需要根据细胞数计算染料浓度的实验,根据细胞数计算接种细胞量的传代实验,单细胞测序相关实验等,在细胞计数、离心收集后再根据细胞数量确定重悬体积,更利于控制细胞浓度
◎ 原代细胞分离
◎ 细胞传代培养
◎ 免疫细胞分离
◎ 检测前细胞样品处理
◎ 温度敏感型细胞需要温控精准,减少细胞温度应激
◎ 细胞洗涤离心时,应尽量弃去上清,避免培养液/PBS 残留,影响后续染色等操作
◎ 升降速过程可能造成细胞的机械损伤,离心时应控制升/降速率
◎ 细胞制品在收集过程应严格控制可能产生的污染
◎ 应将离心过程标准化,利于提高实验的可重复性
转子启动运行后,升降速过程可能造成细胞的机械损伤; 活细胞的离心速度一定要低,优选水平离心,收集更充分。
不同类型细胞离心,它们适合的条件也不同。
传代细胞离心收集:
离心条件:80g-300 x g,常温或者 37°C,时间 3-5 min
检测用细胞离心:
离心条件:100g-300 x g,常温或者 4°C,时间 3-10 min
特殊细胞离心收集:
PBMC 分离条件,400 x g,4°C,20 min
◎ 升降速度可控,有利于细胞梯度离心,减少机械损伤,同时防止细胞重悬,保证细胞活率和回收率。
◎ 多种水平转子可选,适配各种离心耗材,充分满足实验需求。
◎ 温度控制精确,离心过程的温度可实现 32°/35°/37° 等所需温度,减少温度变化对细胞的伤害。
◎ “At set RPM" 定速计时功能,可在达到预设转速时才开始计时,去除了升至设定转速时耗费的时间,确保离心时间为设定时间,实现离心的充分和可重复。
◎ 可选择气密性配件,减少污染风险。
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