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实验室离心机方法选择
点击次数:161 更新时间:2023-11-21

实验室离心机常见的有差速离心法、速率区带离心机和等密度区离心法,它们在不同的实验场景下有不同的应用。


1. 差速离心法:差速离心法是一种常见的离心方法,通过调整离心机转速,使样品在离心管中形成不同的沉降速度,从而实现分离。这种方法适用于分离不同密度的物质,如细胞、蛋白质、DNA等。常见的差速离心机有常规离心机和超速离心机。

差速离心法.png


操作过程中一般是在第一级离心后将上清液与沉淀分开,然后将上清液再在更高转速条件下离心,分离出第二部分沉淀,如此往复逐级加高转速,逐级分离出所需要的物质。差速离心的分辨率不高,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,常用于生化样品的粗制品提取。


2. 速率区带离心机:速率区带离心机是一种特殊的离心机,通过调整离心机转速和离心管中的密度梯度,使样品在离心过程中形成不同的速率区带,从而实现分离。这种方法适用于分离复杂的混合物,如蛋白质、核酸等。速率区带离心机可以实现高分辨率的分离效果。

离心带法.png


比如要从静脉血中分离出单个核细胞,前一种分离液Ficoll将血液中的所有单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)分为一个层,同时提取。而Percoll分离液将血液中淋巴细胞和单核细胞分为两个梯度层,分别提取。梯度液在离心过程中以及离心完毕后取样时,起着支持介质和稳定剂的作用,避免因机械振动而引起已分层的粒子重悬。


采用速率区带离心法时,需要严格控制离心时间,既要有足够的时间使各种粒子在介质梯度液中形成区带,又要避免任一待分离粒子形成沉淀状态。


3. 等密度区离心法:等密度区离心法是一种特殊的离心方法,通过调整离心机转速和离心管中的密度梯度,使样品在离心过程中形成不同的密度区带,从而实现分离。这种方法适用于分离密度相近的物质,如细胞亚细胞器、病毒等。等密度区离心法可以实现高纯度的分离效果。


等密度区带离心.png


等密度区带离心的离心效果取决于颗粒的浮力密度差,密度差越大,分离效果越好,与颗粒的大小和形状无关,但后两者决定着达到平衡的速率、时间和区带的宽度。


等密度区带离心方法的特点:

(1)与样品粒子的密度有关;

(2)与样品粒子的大小和其他参数无关 ;

(3)转速、温度不变,则延长离心时间也不能改变这些粒子的成带位置。




在选择离心方法时,需要根据实验目的、样品特性和离心机设备的性能来确定最合适的方法。同时,操作时要注意遵循离心机的使用说明和实验室的安全操作规程,确保实验的准确性和安全性。


推荐:奥豪斯FC5916/FC5916R 高速多功能大通量离心机


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